合成法所得为外消旋体，须经外消旋拆开。旋光拆开的方法很多，如用酰基-DL-氨基酸的酶进行水解，再利用游离氨基酸与酰化体的溶解度差进行分离。发酵法菌种为产谷氨酸微球菌(Micrococcusglutamicus.Paracolabacterumcoliforme),产氨短杆菌(Brevibacterumammoniagenes)，大肠杆菌(Escherichiacoli)，产气气杆菌(Aerobacteraerogenes)，用葡萄糖、尿素、无机盐等培养基，生成缬氨酸(1～1.5g/100m1)皆为L-型，无需旋光拆开。生产方法用异丁醛作原料，有多种方法可合成外消旋体Chemicalbook缬氨酸。例如异丁醛与氨生成氨基异丁醇，再与氰化氢合成氨基异丁腈，然后水解得到缬氨酸，外消旋本的拆分也有多种方法，例如用酰基-DL-氨基酸的酶进行水解，再利用游离氨基酸与酰化体的溶解度差进行分离。发酵法生产的缬氨酸皆为L-型，无需旋光拆分。发酵法的菌种为产谷氨酸微球菌，产氨短杆菌，大肠杆菌，产气气杆菌。用葡萄糖、尿素、无机盐等培养基。生产方法方法一、化学合成以异丁醛为原料，与氨及氢氰酸发生斯特克(Styecker)反应，生成α氨基异丁腈，然后水解得DL-缬氨酸，再经拆分得L-缬氨酸。方法二、发酵法葡萄糖、尿素、无机盐[产生氨酸微球菌或产氨短杆菌等]→[发酵]L-缬氨酸